Одним из важнейших мест исторического Ростова-на-Дону является дореволюционный храм Преполовения Пятидесятницы, ставший в годы Гражданской войны одним из центров обороны города от большевиков.
Первое упоминание о храме датируется 1824-1829 годами, когда на средства станичников был построен первый вместительный каменный Преполовенский храм в казачьей станице Нижне-Гниловской. Строили храм в течении пяти лет и в 1829 году он был освящен в честь Воскресения Христова. Позже, по просьбе прихожан и по благословению епископа Воронежского и Черкасского Епифания, престольное празднование в храме было отнесено к празднику Преполовения Пятидесятницы, поэтому церковь стала называться Преполовенской. Храм стал настоящим центром духовной общественной жизни станичников.
Примерно через 40 лет после освящения однокупольный Преполовенский храм обрел звонницу над притвором. Вскоре рядом были построены сторожка и канцелярия. При церкви с 1823 года работало двухклассное мужское училище, а с 1878 года — начальное женское училище. В церковный причт входили священник и псаломщик, которые жили на подаяния и помогали в преподавании грамоты детям.
В те времена часто возникала опасная эпидемия холеры, не был исключением и Ростов-на-Дону с прилегающими к нему станицами. Однако набожный народ верил в небесную защиту и одним из средств, противостоявших эпидемии, считалась Аксайская икона Божией Матери — Одигитрия. В 1892—1893 годах в ознаменование избавления горожан от холеры и для предотвращения очередного пришествия болезни при храме была построена часовня во имя Чудотворной Аксайской (Смоленской) иконы Божией Матери Одигитрии. Во время эпидемии люди активно посещали богослужения и с удвоенным усердием молились.
В 1908—1909 годах в храме были возведены два новых придела с престолами: левый, северный придел перестроенного храма 27 октября 1909 г. был освящен во имя святителя Алексия, митрополита Киевского, а правый южный придел 7 декабря 1910 года — в честь Смоленской иконы Божией Матери — Одигитрии. Вскоре была построена высокая звонница, а внутренний интерьер обновленного храма украсили росписи масляными красками с изображениями святых, сюжеты из Священного писания. С 1898 года при Преполовенском храме начала работать церковноприходская школа. Был увеличен причт церкви, в него вошли два священника, диакон и два псаломщика. Количество прихожан также стремительно выросло, казалось, что ничего не помешает размеренной и благочестивой жизни прихода, но впереди ожидали потрясения.
В 1917 году в России произошло два государственных переворота и в декабре город впервые был ненадолго захвачен большевиками. В феврале 1918 года, после смерти атамана Каледина Добровольческая армия генерала Корнилова все же покинула город и под напором многократно превосходящих по численности сил противника отправилась в Первый Кубанский Ледяной поход. Настоятель храма Алексей Часовников принял решение остаться в Ростове и организовать сопротивление большевицкой власти, так храм Преполовения Пятидесятницы стал одним из центров неповиновения богоборческой власти.
После возвращения казачьих и добровольческих частей приход возобновил свою привычную жизнь, но в январе 1920 года Ростов-на-Дону был окончательно захвачен большевиками. Новая власть сразу же начала преследовать христианские приходы Ростова-на-Дону. Храм Преполовения Пятидесятницы был ограблен и в 1933 году окончательно закрыт, после чего постепенно подвергся полному разрушению.
После уничтожения храма звонница использовалась безбожниками для парашютной вышки. В 1942 году в Ростов пришли немецкие и казачьи части, после чего в подвале разрушенного большевиками храма были возобновлены богослужения. Только в 1959 году советская власть окончательно разделалась с приходом, а остатки церковного имущества описываются и сдаются в фонд государства. Формальным поводом для выселения христиан из подвала якобы стала подготовка строительства новой железнодорожной станции, но на самом деле никакого строительства станции проводить не предполагалось. Место, где стоял разрушенный храм, был передан угольному складу № 7, а в здании бывшей церковно-приходской школы устраивается кинотеатр «Мир», который просуществовал до возрождения казачества и православия.
В 1991 году казачья община станицы потребовала закрыть кинотеатр и вернуть здание Преполовенскому приходу, что вскоре было сделано. В том же году у храма появился настоятель Алексий, а в 1996 году началось воссоздание церкви. В 1999 году в еще недостроенном храме Преполовения Пятидесятницы началось проведение богослужения. Трудами первого настоятеля возрожденного храма были организованны музыкальная и церковно-приходская общеобразовательная школа. В наше время в храме хранятся частицы мощей преподобного Амвросия Охтинского и Игнатия Брячанинова, а само здание храма окружено оградой, рядом с храмом находится источник воды и памятный крест казакам, погибшим за Отечество.
Ныне настоятелем прихода является иерей Антоний, сын покойного первого настоятеля храма Алексия. За свои труды иерей Антоний был отмечен медалью Священномученика Николая пресвитера 1-й степени.
