Церковь была построена в Русской слободке. Здесь под видом польских поселенцев, воспользовавшись Манифестом императрицы Екатерины II, поселились несколько русских семей. До 1811 года они жили изолированно от малороссов, а затем по распоряжению правительства вошли в общий состав жителей слободы в числе 73 душ. Район слободки и сейчас хорошо просматривается от ул. Пушкина, Линейной, вверх в пределе Самарской и Нестерова, Новоузенской, улиц.
В 1870 году было открыто церковное попечительство, которое собрало средства, позволявшие содержать церковный хор и церковно-приходскую школу. В 1871 году в здании установили печи. В 1898 году провели реконструкцию и расширение храма. 22 октября 1901 года один из новых приделов был освящен в честь чудотворной иконы Иверской Божией Матери, второй – 7 ноября 1904 года – в честь Михаила Архангела и других бесплотных сил. Приход церкви сначала состоял из 400-460 дворов, где проживало до 2,5 тысяч человек, к 1908-1910 годам 904 двора, около 5 тысяч человек. Первым настоятелем церкви был выпускни Самарской духовной семинарии Василий Рождественский: «благонадежный, умный, который проповеди говорит часто своего содержания». Это он 24 марта 1869 г. открыл первую церковно-приходскую школу, переведенную к 1874 году в состав земских как Покровско-Вознесенскую сельскую народную школу. В 1891-1892 годам учебном году была открыта одно-классная церковно-приходская женская школа в здании, переданном церкви в собственность сельским обществом.
В декабре 1940 году продолжился сбор подписей за закрытие последней церкви города «как остатка прошлого оплота мракобесия». Здание было разрушено накануне войны с Германией.